原代肝实质细胞(肝细胞,Hepatocytes)三明治夹层培养模型的开发是模拟体内肝脏微环境的一项重要生物医疗技术。与传统的二维单层培养模型相比,该模型通过将肝细胞夹置于两层细胞外基质(如I型胶原和Matrigel)之间,不仅重建了细胞极性,还显著延长了肝细胞的功能维持时间。因此,该模型成为研究胆小管网络形成、药物代谢酶活性(如CYP450家族)及多种转运蛋白功能的理想工具。
自20世纪90年代,Liu X、Lecluyse EL和Brouwer KR等人开发了这一模型以来,三明治夹层培养模型在应对单层肝细胞快速去分化和功能丧失的挑战中取得了显著成效。该模型能够维持肝细胞的胆汁排泄功能,提供高效且生理相关的体外药物研究模型,为药物代谢、肝毒性及转运机制的研究奠定了基础。
此外,三明治夹层培养模型在多个生物医疗领域展现出重要价值,包括药物代谢与药代动力学(DMPK)、胆道清除评估、药物性肝损伤(DILI)研究、肝胆转运蛋白功能分析及跨物种肝细胞研究等。尊龙凯时推出的TPCS®原代肝实质细胞三明治夹层培养系统,集成高质量的冻存肝实质细胞与优化的外基质胶(Matrigel),为构建高性能肝细胞三明治夹层培养模型提供了可靠的解决方案。该系统支持多物种,包括大鼠、小鼠、猴子和犬等。经过贴壁三明治夹层培养验证,保证了高贴壁率与卓越的细胞质量,这些特性对构建稳定的三明治夹层培养模型及其后续应用至关重要。
为了验证该优化系统的性能,我们采用CDF荧光探针检测胆小管的形成及MRP2介导的CDF转运功能。结果显示,三明治夹层培养模型中的肝细胞能够形成密集的胆小管网络,并观察到明显的荧光CDF在胆小管中的累积,这表明系统能够有效重建肝细胞的极性和转运功能。
为评估TPCS®三明治夹层培养系统的药物代谢活性,我们使用特异性底物探针测定相I和相II代谢酶活性。结果显示,与传统的二维单层培养相比,三明治夹层培养显著提高了多种代谢酶的活性,进一步突显了其在药物代谢和毒性研究中的应用潜力。
综上所述,利用尊龙凯时的TPCS®原代肝实质细胞构建的肝细胞三明治模型,能够有效维持肝细胞的代谢功能和整体活性,使其在药物筛选、毒理学研究和药物代谢研究中展现出显著的优势。