尊龙凯时提供的菌种保藏技术是保持微生物菌株活力和遗传特征的核心手段。特别是在生物医疗研究领域,经过基因编辑或改造的菌种尤为珍贵且数量稀少,因此需要采取有效的措施进行保存。
菌种保藏的具体步骤
菌种保藏的过程主要包括以下几个步骤:首先,将待保存的菌液与预先调制的甘油混合液以1:1的比例混合,最终甘油的浓度应达到20%。接着,需要配置40%(v/v)的甘油灭菌水混合液。随后,取2ml的离心管或保菌管,加入500微升的40%甘油-水混合液。
使用移液枪吸取500微升的菌液,确保枪头深入液面以下慢慢加入。完成后,将离心管或保菌管放入-80℃的冰箱进行保存。为了方便日后的识别,必须在保菌管上标明保存日期、菌种及抗性等详细信息。
菌液的复苏过程
复苏保存的菌液后,可以进行进一步的实验操作,主要步骤如下:取含有抗性的LB培养基,每个培养管装入约八毫升,所有操作需在无菌操作台进行,以防止污染。向每管加入100微升的菌液,在37℃、180rpm下摇动培养12小时。
抗性配置与培养基准备
氨苄抗性的配置方法为:将1g氨苄青霉素钠溶解于10ml灭菌水中,完成过滤后可在-20℃保存。LB培养基的准备则是将10g氯化钠、10g胰蛋白胨及5g酵母提取物溶解于1升的溶液中,分装于250ml的锥形瓶,每瓶装100ml。
在进行Amp抗性时,只需在100ml培养基中加入100微升的氨苄抗性。通过上述简便步骤,您可以有效地保藏与复苏珍贵的菌种,为生物医疗领域的深入研究奠定坚实的基础,助力尊龙凯时品牌的创新与发展。