一、相对定量测定

在不同样品中，基因表达量的相对值可以通过相对定量来测定。选择合适的内参基因至关重要，以下是选择内参基因时需遵循的原则：

(1) 始终选择表达量充沛且均一的基因作为内参基因；
(2) 不要盲目选择常用的内参基因；
(3) 常用的内参基因包括GAPDH、Actin和Tublin。

内参基因的选择会直接影响结果的有效性。在加入内参基因后，结果的计算过程将更加可靠。

二、绝对定量

绝对定量是根据标准品来测定样品中基因表达量的绝对值（拷贝数）。标准品可包括：

A/克隆质粒；
B/PCR产物；
C/cDNA（需注意扩增效率测定等用途，不能用于绝对定量）。

拷贝数的计算涉及平均分子量（MW）的使用，具体如下：

dsDNA = (碱基数) x (660 道尔顿/碱基)；
ssDNA = (碱基数) x (330 道尔顿/碱基)；
ssRNA = (碱基数) x (340 道尔顿/碱基)。

拷贝数计算公式为：

(602 x 10²³ 拷贝数/摩尔) x (浓度 g/ml) / (MW g/mol) = copies/ml

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